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Etude des conséquences physiologiques de l'utilisation de la thymidylate synthase ThyX.

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Escartin, Frédéric (2008) Etude des conséquences physiologiques de l'utilisation de la thymidylate synthase ThyX. Doctorat LOB, LOB, EP/X p.147.

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Autres Localisations: http://www.imprimerie.polytechnique.fr/Theses/Files/Escartin.pdf

Résumé

La conversion par les thymidylate synthases du désoxyuridine 5’-monophosphate (dUMP) en désoxythymidine 5’-monophosphate (dTMP) est une des étapes clés de la biosynthèse des désoxyribonucléotides pyrimidiques. Chez les procaryotes (bactéries et archées), il existe deux familles de thymidylate synthases non homologues : ThyA et ThyX. La distribution phylogénétique quasi-exclusive des deux familles est complexe et ne suit pas les relations phylogéniques entre les organismes. Les protéines de ces deux familles ne présentent aucune similarité de séquence, de structure et leurs mécanismes et efficacités catalytiques diffèrent.
Les travaux présentés dans cette thèse ont permis de montrer que l’activité de ThyX est essentielle à la survie de la bactérie Rhodobacter capsulatus en absence de thymidine exogène. A partir des résultats de tests de complémentation génétique et de la modélisation mathématique du métabolisme des folates nous avons pu mettre en évidence que seulement une faible activité dihydrofolate réductase était nécessaire à la survie des organismes utilisant ThyX. D’autre part, j’ai pu montrer par des approches génétiques et par l’étude statistique de plus de 400 génomes procaryotes que les organismes utilisant ThyX ont une réplication et un taux de croissance lents, et possèdent majoritairement un petit génome. Je propose un modèle dans lequel la faible activité catalytique de ThyX limite la réplication de l’ADN e!
t par conséquent l’expansion du génome. Enfin, j’ai étudié le métabolisme des pyrimidines chez la bactérie pathogène humaine, Helicobacter pylori. J’ai pu en particulier mettre en évidence qu’en absence de voie de récupération de l’uracile, cette bactérie est capable de métaboliser un analogue toxique le 5-fluorouracile (5FU), utilisé comme anticancéreux. J’ai par ailleurs montré que l’orotate phosphoribosyltransférase de H. pylori était capable de restaurer l’auxotrophie pour l’uracile d’une souche d’Escherichia coli indiquant que cette enzyme pourrait être responsable de la sensibilité de H. pylori au 5FU.
Les travaux présentés dans cette thèse ont permis une meilleure compréhension des conséquences physiologiques de l’utilisation de la thymidylate synthase ThyX. Ils ont notamment permis d’expliquer la distribution apparemment sporadique des deux familles de thymidylate synthases dans le monde procaryote.

Type d'EPrint:Thèse (Doctorat)
Directeur de Thèse:Liebl, Ursula
Date:26 Mai 2008
Jury de Thèse:De reuse, Hilde et Liebl, Ursula et Myllykallio, Hannu et Petit, Marie-Agnès et Radicella, Pablo et Schmitt, Emmanuelle et Sommer, Suzanne
Ecole Doctorale:ED 447 ECOLE DOCTORALE DE L'ECOLE POLYTECHNIQUE
Discipline:LOB
Fonds:Ecole Polytechnique (EP/X)
Institution:EP/X
Laboratoire:LOB
Sujets:7. Sciences de la vie et ingénierie du vivant
Mots-clés libres:Thymidylate synthase, ThyA, Thyx, Nucleotide metabolism, Helicobacter pylori, Genome evolution, Folate, Thymidylate synthase, ThyA, ThyX, Métabolisme des nucléotides, Helicobacter pylori, évolution des génomes, Folate
Code ID:4113
Déposé par :Laurence Vidament
Déposé le :29 Août 2008

Table des Matières

INTRODUCTION
Chapitre I. Le métabolisme des précurseurs des acides nucléiques
Chapitre II. Les génomes procaryotes
RESULTATS et DISCUSSION
Chapitre I. Thymidylate synthases et métabolisme des folates
Chapitre II. Thymidylate synthases et dynamique des génomes procaryotes
Chapitre III. Etude de deux étapes clés du métabolisme des pyrimidines chez H. pylori.
DISCUSSION GENERALE

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