Ovulation, maturation ovocytaire et fecondation in vivo chez la chienne.

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Fontbonne, Alain (2008) Ovulation, maturation ovocytaire et fecondation in vivo chez la chienne. Doctorat Biologie de la reproduction, Ecole Nationale Vétérinaire d’Alfort, UMR 1198 Biologie de la Reproduction et du Développement, AgroParistech 2008AGPT0010 p.116.

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Résumé

La détermination précise du jour de l’ovulation est considérée par la plupart des auteurs comme l’un

des facteurs les plus importants pour fixer le moment optimal d’insémination artificielle chez la

chienne. Ceci est particulièrement important lors d’utilisation de semence congelée en raison de la

faible durée de survie de la semence congelée/décongelée dans l’appareil génital femelle. Notre

étude a tout d’abord tenté de déterminer la technique la plus précise pour identifier la survenue de

l’ovulation chez la chienne. Notamment, nous avons souhaité savoir si l’examen échographique des

ovaires pouvait être un moyen fiable et précis pour déterminer l’ovulation chez la chienne. Notre but a

été de détecter l’ovulation par échographie dans différentes races et d’évaluer les intérêts et la

précision de cette technique, en comparaison avec les taux hormonaux autour de l’ovulation. Nos

résultats ont confirmé que l’échographie ovarienne était une technique précise de détermination de

l’ovulation chez la chienne. Nous avons également démontré que cette technique n’améliorait la

détection de l’ovulation que chez 15,3% des chiennes en comparaison des dosages de progestérone

sanguine. Au bilan, les concentrations de progestérone plasmatique sont extrêmement constantes au

moment de l’ovulation quelle que soit la race et, de ce fait, les dosages de progestérone apparaissent

être une méthode suffisamment précise pour déterminer le moment de l’ovulation. Utilisant les

échographies ovariennes pour la détection du moment de l’ovulation chez la chienne, nous avons

ensuite essayé d’évaluer le déroulement exact de la maturation ovocytaire in vivo chez la chienne,

ainsi que le développement embryonnaire précoce. De plus, nous avons cherché à vérifier si, in vivo,

les spermatozoïdes canins étaient capables de pénétrer des ovocytes encore à un stade immature.

Nous avons démontré que le stade de la vésicule germinative (VG) était le seul présent jusqu’à 44h

après l’ovulation. Le premier stade métaphase II n’est observé qu’à partir de 54h. Plusieurs stades de

maturation ovcytaire différents sont observés au même moment pour une même chienne. In vivo, la

fécondation se produit dans la plupart des cas à partir de 90h post ovulation dans des ovocytes ayant

complété leur maturation (métaphase II). La pénétration in vivo d’ovocytes immatures par des

spermatozoïdes apparaît extrêmement rare.

Ces résultats devraient permettre une amélioration ou une simplification de la pratique vétérinaire

quotidienne, notamment lors d’utilisation d’insémination artificielle en semence congelée. De plus une

meilleure connaissance des processus impliqués dans la maturation ovocytaire in vivo, la

fécondation, et le développement embryonnaire précoce sont des étapes importantes pour améliorer

le développement des biotechnologies de la reproduction dans l’espèce canine.

Table des Matières

Introduction 11

In vivo oocyte maturation, ovulation and fertilisation in the bitch : state of the

art 13

Chapter 1. Determination of ovulation 25

Chapter 2. In vivo oocyte maturation and fertilisation 69

Chapter 3: Optimal timing for artificial insemination with frozen-thawed

semen 83

Discussion and perspectives 89

General conclusion 96

References 97

Annex 1 107

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